Els conductors d'ambulàncies reben una formació professional. D'acord amb la normativa local, les ambulàncies han de comptar amb conductors especialitzats que tinguin la classe adequada de carnet de conduir. Aquests conductors han de tenir almenys tres anys d'experiència de conducció i un historial net d'accidents greus durant els darrers tres anys, que demostrin la capacitat de conduir de manera ràpida i segura a través del trànsit intens, de nit i en condicions meteorològiques adverses.
La formació també inclou habilitats com el control de patins i la conducció fora{0}}de carretera. Tot i que la velocitat és certament important, un viatge suau és essencial quan es transporta un pacient greument malalt o greument ferit mentre el personal mèdic administra l'atenció d'emergència. Conduir ràpidament sense balancejar-se excessivament en els girs o desnivells en carreteres irregulars requereix habilitats de conducció excepcionals i un alt nivell de concentració.
Els centres locals de serveis mèdics d'emergència realitzen formació periòdica de seguretat per als conductors, que cobreix les lleis de trànsit, estudis de casos d'accidents típics, punts clau de seguretat per a la conducció d'emergència i manteniment i resolució de problemes rutinàries dels vehicles. A més, s'organitzen anualment exercicis d'habilitats, entrenaments de reciclatge i competicions per avaluar tant els coneixements teòrics (normatives de trànsit i procediments operatius) com les habilitats pràctiques (inspecció de vehicles, càrrega/descàrrega de lliteres, instal·lació de cadenes de neu, canvi de pneumàtics, CPR, etc.), millorant així contínuament la competència global i les capacitats de resposta a emergències dels conductors.
Les ambulàncies solen estar equipades amb direcció assistida, barres addicionals de protecció contra voladura i sistemes de suspensió posterior modificats per garantir un recorregut suau. La capacitat de passatgers varia segons el tipus de vehicle; per exemple, les ambulàncies de cures intensives acostumen a acollir almenys set persones, mentre que les ambulàncies de pressió negativa-acomoden almenys sis. Aquestes configuracions inclouen el conductor, el personal mèdic, els camillers i el pacient; tanmateix, en situacions d'accident o emergència, només es transporta una llitera.
Un servei d'ambulància eficient hauria de ser capaç d'arribar al lloc dels fets en un termini de 20 minuts després de rebre una trucada d'emergència. Tanmateix, independentment de la qualitat de la formació rebuda per la tripulació, l'arribada ràpida és sovint un repte-sobretot enmig del trànsit urbà congestionat o en zones urbanes més antigues i en ruïnes on pot faltar la senyalització del carrer.
